|
Лекция 12. Репликация. |
|
Принципы. Синтез ДНК in vitro |
|
|
|
| Список рисунков |
Понятие о матрице и затравке
Продукты, образуемые в ферментативной системе in vitro.
 |
Во всех случаях матрицей для синтеза новых цепей служит одноцепочечная ДНК. Затравкой является 3'-гидроксильный конец двуцепочечной ДНК, причем он должен быть спарен с матрицей.
В том случае, если эндонуклеаза вносила ники с 3'-фосфатным концом, ДНК не являлась активированной.
Прямым доказательством того, что затравка - 3'-гидроксильный конец, является эксперимент с дидезоксинуклеозидтрифосфатом.
 |
Если такой активированный нуклеотид сделать меченым по α-фосфату, то он включается в растущую полимерную цепь и всегда обнаруживается на ее 3'-конце. Это говорит о том, что он сам включается, но дальнейший рост цепи невозможен, т.к. нет 3'-гидроксильного конца. |
Это также доказывает и униполярность репликации в направлении
5' 
3'.
| Список рисунков |